-
PCR-ELISA法診斷禽流感
2011-11-3
2292
PCR-ELISA法診斷禽流感PCR-ELISA是將一步RT-PCR技術與酶聯免疫吸附法相結合,檢測病毒的一項診斷技術。PCR的一對引物中,其中一個用生物素標記、另一個用地高辛標記,在酶標微孔板上用親和素包被,PCR擴增后純化片段加入微孔板中。此時,微孔板上包被的親和素將與生物素標記引物上的生物素特異性結合而捕捉了PCR片段,然后在微IL板中加入辣根過氧化物酶標記的抗地高辛抗體,該抗體將與地高辛標記引物上的地高辛結合,從而形成親和素-生物素-PCR片段-地高辛-地高辛抗體-辣... -
酶聯免疫吸附試驗(ELISA)診斷豬囊尾蚴病病
2011-11-1
2760
酶聯免疫吸附試驗(ELISA)診斷豬囊尾蚴病病目前實驗室開發的新型檢測方法主要是以ELISA及改良的ELISA為主。分別用5種不同改良的ELISA平行檢測囊蟲抗體:ABC-ELISA、經典ELISA、SPA-ELISA、快速法ELISA和BAELISA,試驗結果差異不顯著,說明方法學的選擇主要依據習慣和試驗的目的。N.S.Odashima(2002)用ELISA法診斷不同的患者群血清中抗體的種類,發現ELISA—lgG敏感度zui高,分別達到88.5%和93.2%,這說明該方... -
酶聯免疫吸附測定ELISA操作中標本的收集
2011-10-26
2039
酶聯免疫吸附測定ELISA操作中標本的收集用于ELISA測定的臨床標本zui為常用的是血清(漿),有時因為特定的檢測目的,也用到唾液、腦脊液、尿液、糞便等標本。目前使用血清(漿)標本測定的標志物一般有傳染性病原體的抗原和抗體、腫瘤標志物、激素、特種蛋白、細胞因子和治療藥物等。對用于激素和治療藥物測定的血清標本的收集,要注意收集時間甚或體位有可能會對測定結果產生影響。如可的松在早晨4:00—6:00之間,會有一峰值出現;生長激素、促黃體激素(LH)和促卵泡激素(FSH)均以陣發... -
酶標抗體的質量鑒定與保存
2011-10-24
2284
酶標抗體的質量鑒定與保存1.酶活性和抗體效價測定采用雙向免疫擴散法(稀釋抗體)和DAB-H2O2顯色反應檢測結合物中抗體效價和免疫沉淀線中的酶促反應。2.酶量和IgG量酶量(mg/ml)=OD403′0.4IgG量(mg/ml)=(OD280-OD402′0.42)′0.94′0.62其中,0.42為酶蛋白本身(0.3)及結合戊二醛后增加的OD值,0.94為抗體蛋白與醛化酶結合后,OD280約增加6%,故乘以0.94。兔IgG的OD280=1.0時為0.62.過碘酸鈉標記法I... -
ELISA法檢測干擾素
2011-10-20
2123
ELISA法檢測干擾素干擾素(IFN)是一類具有廣譜抗病毒活性的蛋白質,僅在同種細胞上發揮作用。根據其來源、理化及生物學性質的不同,可分為IFN-α、IFN-β、IFN-γ3種干擾素。其中,IFN-α主要由白細胞產生,IFN-β由成纖維細胞產生,IFN-γ主要由T細胞在免疫應答中受到抗原或絲裂原活化后分泌產生。3種干擾素中,IFN-α、IFN-β抗病毒作用較強,IFN-丁免疫調節作用較強。目前已可用基因重組技術制備干擾素投入臨床使用。干擾素不能直接滅活病毒,其抗病毒作用是由于... -
通過噬菌體ELISA鑒定得到的噬菌體克隆
2011-10-18
2918
通過噬菌體ELISA鑒定得到的噬菌體克隆經過3~4輪的篩選后,應該能夠富集到能與受體特異性結合的噬菌體群體。通常而言,在后幾輪的篩選中,每次獲得的噬菌體總量都會增加,但是單就這個現象并不一定能說明已經篩選到了受體特異性結合的肽段。能與靶分子非特異性結合或者能與篩選基質的噬菌體克隆也會造成這一現象。噬菌體ELISA可以說是zui靈敏的鑒定所獲取的噬菌體克隆結合特異性的方法之一。受體被包被在各孔中,與之結合的噬菌體通過辣根過氧化物酶偶聯的抗M13噬菌體抗體檢測。只含有捕獲抗體或者...

